為什么病理標(biāo)本需要固定,?

上次我們知道了一份病理報(bào)告出具前要經(jīng)過很多環(huán)節(jié),也都理解了病理報(bào)告不是即送即出,,需要耐心等待,。(點(diǎn)擊回顧)今天我們繼續(xù)解答大家對(duì)于病理標(biāo)本的疑問,。
大家都知道,一塊肉在常溫下放置一段時(shí)間后就會(huì)變質(zhì),。這是因?yàn)榻M織離體后,,供應(yīng)組織的血液消失,組織細(xì)胞新陳代謝停止,,組織細(xì)胞缺氧失去活性,,細(xì)胞內(nèi)溶酶體膜的結(jié)構(gòu)受到破壞,釋放出各種水解酶,,使組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞,,細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸等高分子化合物,、糖蛋白等化合物降解,。肉變質(zhì),就是細(xì)菌降解加組織自溶水解的結(jié)果,。
病理標(biāo)本也是從人體上取下的一塊“肉”,,怎么能夠讓標(biāo)本不變質(zhì),就要說到病理檢驗(yàn)中一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)——固定,!
1.為了防止組織,、細(xì)胞自溶與腐敗。
2. 防止細(xì)胞內(nèi)水解酶對(duì)蛋白質(zhì)的分解作用,,使細(xì)胞內(nèi)的各種成分如蛋白質(zhì)抗原,、脂肪、碳水化合物或糖類轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì),,以保持原有的結(jié)構(gòu)與生活時(shí)相仿,。
3.使組織和細(xì)胞內(nèi)的抗原蛋白凝固并能夠在特定的位置保留而不向周圍擴(kuò)散。
4.使細(xì)胞內(nèi)各成分沉淀及凝固而產(chǎn)生不同的折射率,,造成光學(xué)上的差異,,從而使得在生活情況下原來看不清的結(jié)構(gòu)變得清晰可見,便于染色后鏡下觀察,。
5.組織固定后,,具有硬化作用,增加了組織的韌性,,有利于取材。
6.對(duì)某些具有傳染性的標(biāo)本,,通過徹底固定能防止疾病的傳播擴(kuò)散,。
組織一經(jīng)離體,越早固定越好,。大標(biāo)本要剖開固定,,以防組織塊過大導(dǎo)致固定液浸透不夠及時(shí),,組織中心部發(fā)生自溶。對(duì)于不同類型并有特殊要求的組織,,要適當(dāng)合理的選擇特殊的固定液,。
一些有特殊要求的染色,像粘液,,糖原,,脂類離體后都需要盡快固定。特別是某些酶的染色,,固定最好在組織離體后30秒至1分鐘,,離體時(shí)間過長(zhǎng),這些酶就會(huì)被水解掉,。
上圖顯示:組織固定及時(shí)有效,,染色清晰、定位準(zhǔn)確,。
其簡(jiǎn)單的定義是,,保持細(xì)胞、組織的固有形態(tài)和結(jié)構(gòu),,使之盡量保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)不變,,便于染色后常規(guī)診斷。
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左圖:組織固定良好,,結(jié)構(gòu)完整,。
右圖:組織固定不良,組織形態(tài)結(jié)構(gòu)和相互關(guān)系在組織處理過程中缺失,。
固定的作用不僅是使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)凝固,,盡量減少或終止外源性酶和內(nèi)源性酶的反應(yīng);防止細(xì)胞的自溶,,以免使抗原擴(kuò)散至組織間質(zhì),;不但要使抗原不導(dǎo)致失活,而且不使抗原發(fā)生彌散的現(xiàn)象,,才能在免疫組化染色時(shí),,不產(chǎn)生過深的背景,影響對(duì)陽性物的判斷,。
需要做免疫組化或分子病理的標(biāo)本,,從標(biāo)本離體至組織脫水開始,總固定時(shí)間一般不要超過48小時(shí),,同時(shí)也不要少于24小時(shí),。
在組織病理學(xué)中,不管是組織切片乃至電鏡還是大體標(biāo)本的保存,都必須進(jìn)行及時(shí)有效的固定,。良好的固定是制作優(yōu)秀病理切片的基礎(chǔ),,也是特殊染色、酶組織化學(xué),、免疫組織化學(xué)和組織原位分子雜交等技術(shù)方法賴以成功的基礎(chǔ),。因此,在病理技術(shù)工作中必須高度重視組織的固定,。
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本文編輯:楊昕昕
圖文校驗(yàn):朱萌萌
責(zé)編:吳行

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